【儀器設備網 行業應用】本方案中,我們使用華法林和呋塞米作為代表性分子,在?家典型的發現生物分析實驗室開展了研究。我們研究Xevo TQ Absolute串聯四極桿質譜儀這款新產品如何高靈敏度定量人和大鼠血漿中的華法林和呋塞米。
使用ACQUITY Premier UPLC系統和Xevo TQ Absolute串聯四極桿質譜儀定量從人和大鼠血漿中提取的華法林和呋塞米。能夠實現:人和大鼠血漿中華法林和呋塞米的LLOQ分別為25 pg/mL和100 pg/mL;校準曲線和各QC濃度上所有點的%CV均<12%,完全位于生物分析驗收標準的允許范圍內。ACQUITY Premier UPLC系統和Xevo TQ Absolute串聯四極桿質譜儀可提供優異的穩定性和靈敏度,且方法性能不受影響,因此是適用于發現生物分析實驗室的理想平臺。
實驗部分
1樣品前處理
用100 ng/mL的華法林和呋塞米儲備液加標大鼠和人血漿,建立0.025 - 100 ng/mL的校準曲線。使用單獨儲備液(100 ng/mL)生成LLOQ、LQC、MQC和HQC的QC樣品。使用乙腈按1:3的比例進行蛋白沉淀,所有樣品均提取100 μL,?式三份。將樣品離心,上清液轉移到LC-MS樣品瓶以供分析。
2液相色譜條件
液相色譜系統:ACQUITY Premier UPLC系統
色譜柱:MaxPeak UPLC HSS T3 2.1 x 50 mm色譜柱
柱溫:60°C
樣品溫度:5°C
進樣體積:1 μL
流速:600 μL/min
流動相A:含0.01%甲酸的100%水溶液
流動相B:含0.01%甲酸的100%乙腈溶液
梯度:在1.5 min內從5%增?95%
3質譜條件
質譜系統:Xevo TQ Absolute
電離模式:ESI-
毛細管電壓:0.5 kV
MRM通道:
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