【儀器儀表網 行業應用】傳統農藥成分分析預處理方法(QuEChERS方法)是一種在法醫學中毒分析的有效的預處理方法。適用于全血樣品中藥物、毒物提取。本方法是一種可以提取多種成分穩定且可靠的樣品預處理方法。但傳統QuEChERS方法均為手動操作流程,特別樣品量較大時傳統手工難以應對,需要很長時間才能完成操作。
本應用介紹了以全自動方法進行QuEChERS萃取流程的案例,以省力、高效和提高樣品預處理精度為目的,學會所發表了運用全自動液體萃取平臺ATLAS-LEXT進行全血樣品預處理方法開發及方法學評價的相關內容。
▌實驗方法
試劑
阿普唑侖Alprazolam、溴西泮Bromazepam、溴替唑侖Brotizolam、氯硝西泮Clonazepam、地西泮Diazepam、依替唑侖Etizolam、氟硝西泮Flunitrazepam、氟西泮Flurazepam、尼美西泮Nimetazepam、硝西泮Nitrazepam、奧沙西泮Oxazepam、三唑侖Triazolam和卡馬西平Carbamazepine、奎硫平Quetiapine、唑吡坦Zolpidem,共計15種(全血樣品中添加濃度為1~200ng/mL)
預處理
采用QuEChERS自動化方式預處理供LC/MS分析: ATLAS-LEXT自動預處理流程見圖1。取添加上述藥物的120μL血液樣品的試管A,加去離子水振蕩,稀釋5倍。取含有QuEChERS提取鹽*0.1g和2個不銹鋼珠的試管B,加乙腈2000μL和內標溶液20μL,振蕩30秒鐘,向試管B中添加試管A稀釋血液樣品500μL,振蕩3分鐘,在2000×g下離心5分鐘,防乳化傳感器確認后取上清液2000μL,轉移至試管C中。氮氣吹干后加甲醇250μL,振蕩30秒后再溶解,移取至自動進樣器瓶中待分析。(所需時間: 30分鐘/樣品)
▌總結
我們詳細驗證了添加溶劑和提取鹽的含量、移液時的針位的高度等內容,開發出一種盡可能減少提取過程中目標物損失的程序。方法學驗證結果表明,其可以自動化的執行手工預處理的全部程序。
1. 使用QuEChERS提取鹽的乙腈提取法(LC/MS用提取法)
2. 使用QuEChERS提取鹽的乙腈提取法+dSPE純化處理的試樣制備法(GC/MS用提取法)
我們詳細驗證了添加溶劑和提取鹽的含量經確認,2種操作方法都沒有殘留發生。本法具有穩定的操作性、良好的定量重現性,是一種具有極高實用性的自動化萃取方法。
自動預處理裝置 ATLAS-LEXTTM
操作簡單,功能可編輯
設計緊湊,可置于通風櫥內,有效避免操作者與生物樣品的接觸
具有較高的萃取能力,萃取回收率滿足要求
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